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医学职称论文浅谈动态观察柴胡皂苷a对实验性癫痫小鼠痫性发作的影响

来源:职称驿站所属分类:精神医学论文发布时间:2015-11-30 17:51:32浏览:

   这是一篇医学职称论文,探讨动态观察柴胡皂苷a对实验性癫痫小鼠痫性发作的影响。

  【关键词】 柴胡皂苷,医学职称论文

  摘要:目的 研究柴胡皂苷a(saikosaponin a,SSa)对戊四氮(PTZ)诱导的小鼠痫性发作的影响,了解其药效特点。 方法 采用PTZ诱导小鼠急性痫性发作来制作癫痫模型,通过记录不同时间点小鼠痫性发作潜伏期和强直性惊厥率的变化,研究SSa抗小鼠PTZ致痫作用的动态特征。结果 SSa 腹腔注射30、60、90 min组能显着延长阵发性痉挛潜伏期(P0.05),其中SSa 90 min组作用最为显着(P001)。在60、90、120 min组中,SSa 腹腔注射也能明显延长强直性惊厥潜伏期(P0.05),其中尤以90 min组作用显着(P001); SSa 90 min组对过渡时间延长作用显着(P0.05);SSa 30 min、60 min组能减少PTZ致痫小鼠强直性惊厥发作例数(P005),且以SSa 60 min组作用最为显着。结论 SSa具有对抗小鼠PTZ致痫作用;腹腔注射SSa对PTZ诱导小鼠的痫性发作在120 min内以60 min、90 min药效作用较强。

  关键词:实验性癫痫;柴胡皂苷 a; PTZ;小鼠

  柴胡皂苷(saikosaponin)为中药柴胡的主要成分之一,其单体成分之一的柴胡皂苷a(SSa)有降血脂、抗渗出、抗肉芽肿和保护肝细胞等作用[1],对于慢性肾病的治疗也有较好疗效[2,3],但目前尚没有SSa抗癫痫作用的报道。不过已有不少证据表明柴胡及柴胡总皂苷具有镇静和抗实验性癫痫的作用[4,5]。在柴胡皂苷单体各成分中,为明确何种皂苷单体具有抗癫痫作用,笔者研究了SSa对PTZ致痫小鼠痫性发作的影响,并探讨SSa对痫性发作影响的不同时间的动态变化,以期了解SSa抗癫痫药效作用的时间特点。

  1 材 料

  1.1 动物

  健康昆明种小鼠180只,雌雄各半,体质量(20±2)g,由南方医科大学动物实验中心提供,合格证号为2004A063。

  1.2 主要试剂

  柴胡皂苷a购自上海医药工业研究所,批号050106;丙戊酸钠(VPA)注射剂(德巴金)由杭州赛诺菲圣德拉保民生制药有限公司生产,批号0402049。 戊四氮由美国Sigma公司生产,批号064k0686。

  2 实验方法 1 实验动物分组

  将180只昆明小鼠随机分为9 组,每组20只,雌雄各半。A组:生理盐水组(生理盐水+ PTZ致痫),作为以下各组的对照组;B、C、D、E组分别为经SSa预处理30、60、90、120 min组(SSa 30 min、SSa 60 min、SSa 90 min、SSa 120 min + PTZ致痫);F、G、H、I组分别为经VPA预处理30、60、90、120 min组(VPA 30 min、VPA60 min、VPA90 min、VPA120 min + PTZ致痫)。 2 模型制备及给药方法

  A组小鼠在腹腔内注射生理盐水(10 mL/kg)后30 min时腹腔注射PTZ(85 mg/kg)致痫;B、C、D、E组小鼠分别在腹腔注射SSa(7.24 mg/kg)后30、60、90、120 min时腹腔注射上述剂量的PTZ致痫;F、G、H、I组小鼠分别在腹腔注射VPA (200 mg/kg)后30、60、90、120 min时腹腔注射上述剂量的PTZ致痫。 3 观察指标

  小鼠痫性发作分级采用Racine标准[4]。0级:无发作反应;1级:节律性口角、耳或面部肌肉抽动阵挛;2级:点头并伴随更严重的面部肌肉抽动阵挛;3级: 出现前肢阵挛但不伴随直立;4级:前肢阵挛伴随直立;5级:全身强直阵挛发作而跌倒。腹腔注射PTZ后立即观察小鼠的行为动作,连续10 min,记录小鼠痫性发作潜伏期,包括阵发性痉挛潜伏期(即从注射PTZ开始至相当于1~3级发作的时间)、强直性惊厥潜伏期(即从注射PTZ开始至相当于5级发作的时间),计算由阵发性痉挛向强直性惊厥发作的过渡时间;并记录发生强直性惊厥的例数,计算其发作率。 4 统计学处理

  应用SPSS10.0软件,多样本均数的比较采用方差分析,计数资料及率的比较用卡方检验,以P005为差异有显着性。

  3 结 果 1 SSa对PTZ致痫小鼠痫性发作潜伏期的动态影响

  将对应时间点SSa预处理、VPA预处理组与生理盐水组比较,B、C、D、F、G、H各组阵发性痉挛潜伏期明显延长,与A组比较差异有显着性(P0.05),其中尤以D、F、G组差异显着(P0.01);C、D、E、F、H组强直性惊厥潜伏期同样延长,与A组比较差异有显着性(P0.05),其中尤以D、F组差异显着(P001);在过渡时间的比较中,D、F组与A组比较差异均有显着性(P0.05),其中尤以F组差异显着(P0.01)。将对应时间点的SSa组与VPA组比较,30 min时 SSa组对各潜伏期的延长作用不如VPA组(P001),其余各时间点比较差异无显着性。见表1。以上结果提示,SSa不仅能明显延长阵发性痉挛潜伏期,而且能够显着延长强直性惊厥潜伏期及其过渡时间,其作用在60 min、90 min时强于30 min、120 min时,而VPA的作用以30 min和60 min强于90 min与120 min,可见SSa达到最佳作用的时间比VPA延后。表1 SSa对PTZ致痫小鼠痫性发作潜伏期的动态影响(略) 2 SSa对PTZ致痫小鼠强直性惊厥发作例数的动态影响

  根据小鼠10 min内在PTZ诱导下出现强直性惊厥的例数,将对应时间点SSa预处理组、VPA预处理组与生理盐水组比较,SSa与VPA预处理30 min、60 min组出现强直性惊厥例数与生理盐水组比较差异有显着性,其作用优于90 min、120 min组。见表2。表2 SSa对PTZ致痫小鼠强直性惊厥发作例数的动态影响(略)

  4 讨 论

  PTZ为很强的致痫剂,其致痫模型被认为是理想的全身强直性惊厥发作模型之一,PTZ本身无特殊的神经毒性作用[6],所以被广泛应用于癫痫发病机理的研究、抗癫痫药物的筛选。当PTZ诱发小鼠癫痫发生时,其痫性发作的特点是初期以阵挛性发作为主,很快以全身强直性惊厥发作为主要特点,根据其发作特点,在本研究中以这2种发作形式为指标并结合目前公认的Racine标准来分析其痫性行为。

  VPA是临床常用抗癫痫的主要药物之一,有广谱抗癫痫作用,对单纯失神发作及全身强直阵挛(惊厥)发作疗效最好,对单纯及复杂部分性发作、肌阵挛性发作等也有良效。有文献研究VPA在大鼠血清和脑脊液浓度变化时发现,脑脊液内最高药物浓度低于血清浓度,且其达到最高药物浓度时间迟于血清药物最高浓度,其半衰期约为60 min[7]。本研究也证实VPA既能延长阵发性痉挛、强直性惊厥的潜伏期,也能抑制强直性惊厥发作率,明显减少惊厥发生例数,其作用以30 min和60 min时尤为明显,与文献报道一致。本研究结果显示,SSa不仅能明显延长小鼠阵发性痉挛的潜伏期,而且能够显着延长强直性惊厥的潜伏期及其过渡时间,能明显减少小鼠发生强直性惊厥的例数,抑制惊厥发作率,其作用在60 min、90 min时较强。提示SSa具有较好的抗实验性癫痫作用,可能对肌阵挛性发作、全身强直阵挛发作有效。就本研究给出的剂量而言,30 min时 SSa对小鼠各潜伏期的延长作用不如VPA,但随着时间的延长,SSa在60 min、90 min时对潜伏期的延长明显,可能与SSa的起效作用较慢有关。至于SSa的代谢特点,有研究显示其口服代谢时与消化道的菌群有密切关系[8],其代谢呈现时间依赖性,早期有学者将其在体外胃液及肠道细菌共同培养发现SSa在3 h内完全被代谢,而转化为其他类型的皂苷或苷元[9]。

  但SSa在血清及脑脊液中的变化情况如何,其代谢与药效作用是否相关,以及SSa能否在更长的时间内维持其作用,还有待进一步研究。

  参考文献:

  [1]欧明,林励,李衍文.简明中药成分手册[M].北京:中国医药科技出版社,2003:318.

  [2]张相年,张相波. 柴胡皂苷的生理活性及在治疗肾病中的应用[J].广东药学院学报,2000,16(2): 121.

  [3]HATTORI T,ITO M,SUZUKI Y. Studies on antinephritic effects of plant components in rats (1):effects of saikosaponins originaltype antiGBM nephritis in rats and its mechanisms[J]. Nippon Yakurigaku Zasshi,1991,97(1):13.

  [4]李静,谢炜,陈宝田.柴胡对实验性癫痫大鼠的治疗作用[J].中药药理与临床,2000,16:28.

  [5]黄运生,谢炜,陈宝田.柴胡皂苷对癫痫大鼠脑电图影响[J].第一军医大学学报,2004,24(12):1 379.

  [6]HOLMES G L. Seizureinduced neuronal injury animal data [J].Neurology,2002,59(suppl 5):S3.

  [7]龙小艳,章蓓,肖波.丙戊酸在癫痫大鼠海马的神经药代动力学特征[J].脑神经杂志,2002,10(6):330.

  [8]严梅桢.人肠道菌对柴胡皂苷的代谢[J].国外医学:中医中药分册,2001,23 (3) :156

  [9]SHIMIZU K,AMAGAYA S,OGIHARA Y. Structural transformation of saikosaponins by gastric juice and intestinal flora[J]. J Pharmacobiodyn,1985,8(9):718.

  《临床肺科杂志》安徽医学论文投稿,是面向全国的肺科专业学术月刊。中国科技论文统计源期刊及中国科技核心期刊,以提高肺科常见病、多发病的临床诊断、治疗水平为目的,并交流学术成果。2011年版中文核心期刊。目前是中文核心期刊·中国医学类核心期刊,中国学术期刊数据库全文检索期刊,中国科学引文数据库扩展库期刊,中国生物学文摘和文献数据库期刊。《临床肺科杂志》主管单位安徽省教育厅,主办单位安徽医科大学、解放军105医院,创刊时间1996年,出版周期月刊,国内刊号CN:34-1230/R,国际刊号ISSN:1009-6663

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