34βE12、P63及P504S在前列腺增生及前列腺癌组织中的表达及意义

　　摘要：目的：探讨34βE12、P63及P504S在前列腺癌及前列腺增生中的表达情况及其在良恶性病变的鉴别意义。方法：应用免疫组化SP法，选用P504S联合34βE12及P63抗体，对117例前列腺电切或穿刺标本进行检测。结论：联合应用P504S、34βE12及P63免疫组化检测，对前列腺良恶性病变鉴别诊断具有重要意义。

　　关键词：前列腺癌,前列腺增生,34βE12,P63,P504S

　　前列腺癌在世界最常见的肿瘤中位于第六位，在男性常见肿瘤中排第三位，且有上升的趋势。血清学PSA大范围的筛查后，选择性进行前列腺穿刺活检，虽然可以提高前列腺癌的检出率，但单凭HE染色光镜下观察前列腺基底细胞是否消失来诊断前列腺癌，已远远不能满足确诊的需要。为此，本文应用免疫组化方法，联合检测34βE12、P63及P504S在117前列腺电切/穿刺标本中的表达，探讨其在前列腺良恶性病变鉴别诊断中的价值。

　　1 材料和方法

　　1.1标本来源：选取本院2003年-2010年前列腺电切及穿刺标本共117例，患者年龄60-89岁，平均年龄73岁。依照WHO诊断标准，由副主任医师以上的病理诊断医生诊断，其中前列腺增生症61例，前列腺癌43例，前列腺低级别上皮内肿瘤7例，前列腺高级别上皮内肿瘤6例。

　　1.2 方法：所有送检标本均用10%中性福尔马林充分固定，常规石蜡包埋切片染色，并预留白片行免疫组化染色。免疫组化采用SP法，经微波修复处理，一抗4度过夜，DAB显色，以PBS缓冲液代替一抗，作阴性对照。所用试剂抗体及试剂盒均来自北京中杉金桥生物公司，并严格按照试剂说明书步骤操作。

　　1.3 结果判断 P504S以细胞质出现棕黄色颗粒为阳性表达，34βE12以细胞膜出现棕黄色颗粒为阳性表达，P63以细胞核出现棕黄色颗粒为阳性表达，上述部位均无棕黄色颗粒为阴性表达。

　　2 结果

　　2.1 34βE12阳性部位在细胞浆， 在61例前列腺增生、13例PIN及 43例前列腺癌旁组织标本中，基底细胞均呈阳性表达，但阳性强弱不等，而在43例前列腺癌组织中，均呈阴性表达。

　　2.2 P63阳性部位在细胞核，在61例前列腺增生、13例PIN及43例前列腺癌旁组织标本中，基底细胞均呈阳性表达，而在43例前列腺癌组织中，均中阴性表达。

　　2.3 P504S 阳性部位在细胞浆，在43例前列腺癌中，呈阳性表达，在61例前列腺增生中呈阴性表达，而在7例低级别PIN及6例高级别PIN中分别有2例及3例的弱阳性表达。

　　3 讨论

　　在临床工作中，绝大部分前列腺标本均为电切或穿刺标本，在病变不典型的情况下，仅靠光镜确诊前列腺癌是一项艰巨的工作。P504S为α-甲基酰基辅酶A-消旋酶(AMACR)，它的基因定位于染色体5P13，存在于胞质过氧化物酶和线粒体上，在侧链脂肪酸的β氧化中发挥重要作用，最近发现前列腺癌内mRNA表达上调以至于蛋白产物过度表达。用P504S免疫组化染色，前列腺癌组织呈阳性，而良性腺泡呈阴性，对明确诊断效果明显[1]。2000年Xu等[2]采用基因芯片筛选发现P504S在前列腺癌中过表达,而和正常的前列腺上皮细胞无反应，前列腺癌的P504S表达率为82%~100%。本组中p504s在前列腺癌中的表达率为100%，高级别上皮内肿瘤的阳性表达率50%，低级别上皮内肿瘤的阳性表达率为28.6%，与以上报道基本相符。

　　前列腺癌的病理诊断标准，主要依据组织学结构、细胞异型性及基底细胞消失这三个指标，特别是早期病变，基底细胞消失尤为重要。34βE12及P63均可以用作标记前列腺基底细胞，近年来，有国内外病理学家用34βE12对前列腺基底细胞进行标记来判断其是否为癌，但由于各种原因，假阳性或假阴性的现象时有发生[3]。有研究报道，p63是p53肿瘤抑制基因的同源性基因，位于染色体3q27-29，它在不同上皮的基底细胞胞核选择性表达，研究显示p63是一种新的基底细胞标记物，其特异性及敏感性比34βE12更胜一筹。p63作为标记物用于前列腺良恶性病变鉴别有较理想的效果[4]。本研究中，34βE12在前列腺癌组织中均呈阴性表达，在癌旁组织、PIN及前列腺增生组织中呈强弱不等的阳性表达，而P63则在上述组织中阳性表达的效果要比34βE12稳定。本组结果表明，P63抗体能特异地与基底细胞的胞核反应显示基底细胞的存在，而腺体上皮细胞呈阴性反应。大多数前列腺良性增生性病变，P63显示阳性，在腺泡周围呈连续性分布。研究显示，P63染色敏感度较34βE12更高，此点与文献报道一致[5]。

　　P504S敏感性高，但特异性不强，因此，联合检测P504S、P63及34βE12，可以大大提高前列腺癌的检出率，从而提高对前列腺穿刺标本的诊断水平，特别是对小灶病变的诊断。

　　参考文献

　　[1] 陈光勇,刘丽娜,周小鸽,等.α-甲酰基辅酶A消旋酶在前列腺腺癌诊断和鉴别诊断中的作用[J].中华病理学杂志,2004,33(5):419-423.

　　[2] 胡志红,徐晓,彭进.CK34βE12、P63表达在乳腺癌和前列腺癌诊断中的应用价值[J].山东医药,2005,45(32):10-12.

　　[3] 张子杰,李印.CK34βE12、p63和PSA、P504S在前列腺穿刺诊断中的应用[J].实用诊断与治疗杂志,2007,21(5):389-390.

　　[4] 成辉：前列腺特异抗原在前列腺癌诊断中的临床价值，临床和实验医学杂志，2008，7(8)：77-76.

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